Yeast cell-based assay of topoisomerase II inhibitory activity
เอนไซม์โทโพไอโซเมอเรส II (Top2) เป็นเอนไซม์ที่มีความสำคัญในกระบวนการจำลองตัวของเซลล์และมีความสำคัญต่อการดำรงชีวิตของเซลล์ของสิ่งมีชีวิต ในการทดสอบฤทธิ์ยับยั้งเอนไซม์ Top2 ของพืชสมุนไพรไทยโดยการใช้เซลล์ยีสต์ ได้ใช้ยีสต์ Saccharomyces cerevisiae ที่กลายพันธุ์และมีความไวต่ออุณหภูมิที่ใช้ในการเพาะเลี้ยง...
Saved in:
Main Author: | |
---|---|
Other Authors: | |
Format: | Theses and Dissertations |
Language: | English |
Published: |
Chulalongkorn University
2011
|
Subjects: | |
Online Access: | https://digiverse.chula.ac.th/Info/item/dc:32073 |
Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
Institution: | Chulalongkorn University |
Language: | English |
Summary: | เอนไซม์โทโพไอโซเมอเรส II (Top2) เป็นเอนไซม์ที่มีความสำคัญในกระบวนการจำลองตัวของเซลล์และมีความสำคัญต่อการดำรงชีวิตของเซลล์ของสิ่งมีชีวิต ในการทดสอบฤทธิ์ยับยั้งเอนไซม์ Top2 ของพืชสมุนไพรไทยโดยการใช้เซลล์ยีสต์ ได้ใช้ยีสต์ Saccharomyces cerevisiae ที่กลายพันธุ์และมีความไวต่ออุณหภูมิที่ใช้ในการเพาะเลี้ยง (temperature sensitivity) จากการทดสอบฤทธิ์ยับยั้งเอนไซม์ Top2 ของสารสกัดหยาบจากพืชสมุนไพรไทยจำนวน 30 ตัวอย่าง พบว่าสารสกัดหยาบจากพืชสมุนไพรไทยจำนวน 6 ตัวอย่าง ได้แก่ เหง้าขมิ้นชัน เหง้าขมิ้นอ้อย เถาเถาวัลย์เปรียง ต้นพญามุตติ หัวสบู่เลือด และหัวบอระเพ็ดพุงช้างมีฤทธิ์ยับยั้งเอนไซม์ Top2 สารสกัดจากเถาวัลย์เปรียงถูกเลือกเพื่อทำการศึกษาต่อให้ทราบถึงสารสำคัญที่มีฤทธิ์ดังกล่าว เนื่องจากยังไม่เคยมีรายงานถึงฤทธิ์การยับยั้งเอนไซม์ Top2 ของพืชชนิดนี้มาก่อน จากการศึกษาองค์ประกอบทางเคมีของเถาวัลย์เปรียงโดยใช้ฤทธิ์ทางชีวภาพในการยับยั้งเอนไซม์ Top2 โดยใช้เซลล์ยีสต์เป็นตัวนำ สามารถแยกสารกลุ่ม isoflavones ได้ 2 ชนิด คือ 5,7,4 -trihydroxy-6,8-diprenylisoflavone และ lupalbigenin ซึ่งได้ทำการพิสูจน์โครงสร้างทางเคมีของสารทั้งสองโดยอาศัยเทคนิคทางสเปคโตสโคปีร่วมกับการเปรียบเทียบข้อมูลจากงานวิจัยที่มีรายงานมาแล้ว การทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพของสารทั้งสองชนิดพบว่า สารทั้งสองชนิดมีฤทธิ์ต้านเซลล์มะเร็งในช่องปากชนิด KB เซลล์มะเร็งเต้านมชนิด MCF-7 และเซลล์มะเร็งปอดชนิด NCI-H187 และยังแสดงฤทธิ์ยับยั้งการคลายเกลียวของสายดีเอ็นเอชนิด supercoiled ค่า IC₅₀ ของ 5,7,4 -trihydroxy-6,8-diprenylisoflavone และ lupalbigenin มีค่าเท่ากับ 24.4 และ 18.7 µM ตามลำดับ ข้อมูลที่ได้เป็นการรายงานครั้งแรกถึงกลไกการยับยั้งเอนไซม์ Top2 และการแสดงฤทธิ์ทางชีวภาพของสารสำคัญสองชนิดจากเถาวัลย์เปรียง |
---|