Pengembangan kit diagnostik dengan biomarker ESAT-6 dan AG85A ebagai alat deteksi dini penyakit tuberkulosis

• Main Authors: Rahayu Anggraini, Dr., SKM., M.Si, Jusak Nugraha, Dr.,dr., MS., Sp.PK(K), E. Bimo Aksono H, Dr.,drh., M.Kes, Ali Rohman, Drs., M.Si
• Format: Other NonPeerReviewed
• Language: Indonesian
• Published: UNIVERSITAS AIRLANGGA 2012
• Subjects: Q179.9-180 Research
• Online Access: http://repository.unair.ac.id/43055/1/gdlhub-gdl-res-2013-anggrainir-27238-lp.03-13-p.pdf; http://repository.unair.ac.id/43055/; http://lib.unair.ac.id
• Institution: Universitas Airlangga

Tujuan jangka panjang penelitian ini sebagai kontrol yang efektif dalam pemberantasan penyakit Tuberkulosis dengan target khusus yang ingin dicapai dapat menekan tingkat morbiditas dan mortalitas kejadian penyakit Tuberkulosis di Indonesia. Tujuan khususnya memperbanyak antigen yang dapat menirnbulkan respon imun spesiftk seluler (ESA T6 dan Ag85A), sehingga mampu mendeteksi penyakit Tuberkulosis paru, penyakit Tuberkulosis paru dengan terapi, penyakit Tuberkulosis ekstrapulmonal. Metode yang akan digunakan, ekstraksi DNA dari bakteri M tuberculosis H3 7Rv dan M tuberculosis spesifik Indonesia. PCR dilakukan dengan menggunakan oligonukleotida primer gen spesifik dan produk PCR dimasukkan ke dalam vektor pTZ57R!T dan ditransfer ke Escherichia coli DH5a untuk menghasilkan antigen rekombinan Ag85A dan ESA T6 (Tahun Pertama). Selanjutnya dilakukan Ekspresi pada vector E. coli BL-21 dan dimumikan dengan HPLC. Hasil ekspresi dipuriftkasi untuk uj i imunogenitas sehingga mendapatkan antigen spesiftk. Selanjutnya dilakukan proses hibridoma untuk menghasilkan antibodi monoklonal secara kultur sel. Kultur sel akan menghasilkan Anti-Ag85A dan Anti-Esat6 untuk dijadikan biomarker dan kit diagnostik. Kit ini dapat mendeteksi dini antigen bakteri M tuberculosis pada manusia terinfeksi M tuberculosis dengan cepat, spesifik, sensitif, murah, dan mudah digunakan.