UJI KEBERHASILAN TRANSFORMASI GEN β-I,3-ENDOGLUCANASE KE DALAM KUBIS ((Brassica oleracea var. capilata L.)MENGGUNAKAN METODE PCR

• Main Author: Irwanti Nurika Vidayanti, 089811859
• Format: Theses and Dissertations NonPeerReviewed
• Language: Indonesian
• Published: 2003
• Subjects: Q Science
• Online Access: http://repository.unair.ac.id/46327/1/KK%20MPB%2009-03%20Vid%20u.pdf; http://repository.unair.ac.id/46327/; http://lib.unair.ac.id
• Institution: Universitas Airlangga

Penelitian ini bertujuan untuk menguji keberadaan gen β-l,3-endoglucanase dalam tunas kubis hasil regenerasi setelah ditransfonnasi dengan gen tersebut dengan perantara bakteri Agrobacterium tumefaciens. Sampel yang diuji adalah 3 tunas kubis basil transfonnasi yang mampu tumbuh pada medium seleksi kanamycin (Tl, 12 dan 13). Kontrol positifyang digunakan adalah plasmid pROKla-EG (P), sedangkan kontrol negatifnya adalah tunas yang tidak mengalami transfonnasi (K). Semua sampel dan kontrol diisolasi DNA-nya kemudian dilakukan proses PCR untuk mengamplifikasi pita DNA sebesar 830 bp yang merupakan daerah pertemuan antara gen β-I,3-endoglucanase dengan promotor CaMV 35S pada plasmid pROKla-EG. Analisis amplikon menunjukkan bahwa 12 dan 13 menghasilkan pita DNA yang berukuran sarna dengan plasmid pROKla-EG yang merupakan kontrol positif, dengan ukuran ± 830 bp sedangkan II dan kontrol negatif tidak menghasilkan pita DNA tersebut. Kesimpulan yang dapat diambil adalah bahwa 12 dan 13 adalah tunas yang telah tersisipi gen p-I,3-endoglucanase. Keberbasilan transfonnasi gen p-I,3-endogluc