KARAKTERISASI LIPOPOLISAKARIDA Brucella abortus S19 DENGAN UJI INDIRECT SANDWICH ELISA DAN UJI DOTBLOT

• Main Author: TRI HANDAYANI, 069812602
• Format: Theses and Dissertations NonPeerReviewed
• Language: Indonesian
• Published: 2005
• Subjects: QL1-991 Zoology
• Online Access: http://repository.unair.ac.id/53221/1/53221.pdf; http://repository.unair.ac.id/53221/; http://lib.unair.ac.id
• Institution: Universitas Airlangga

ABSTRAK Penelitian ini bertujuan untuk mendeteksi lipopolisakarida (LPS) Brucella abortus Strain19 dengan menggunakan uji indirect sandwich Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) dan uji dot blot serta mengetahui ada atau tidaknya perbedaan determinan antigen antara LPS Brucella abortus S19 dan LPS Eschericia coli. LPS diisolasi dari B.abortus S19 dengan cara ekstrasi fenol. Hewan percobaan yang digunakan adalah mencit jantan umur enam minggu sebanyak 14 ekor yang diiinjeksi secara subkutan dengan LPS B.abortus S19 ditambah Complete Freund Acijuvant (CFA) pada injeksi pertama dan Incomplete Freund Adjuvant (IFA) pada injeksi ulang serta kelinci jantan empat ekor umur dua bulan yang diinjeksi secara subkutan dengan B.abortus S 19 aktif. Dua minggu setelah booster terakhir dilakukan pengambilan darah untuk diambil serumnya yang mengandung antibodi poliklonal. Antibodi poliklonal selanjutnya digunakan untuk mendeteksi LPS B.abortus S19 dengan uji indirect sandwich ELISA dan uji dot blot. Kontrol negatif dilakukan dengan larutan Phosphat Buffer Saline (PBS) dan juga dilakukan uji reaksi silang antara antibodi yang telah dimurnikan tersebut dengan LPS dari E.coli. Pada indirect sandwich ELISA, dilihat Optical Density (OD) sedangkan pada uji dot blot, adanya bintik berwarna ungu (dot) menunjukkan spesifikasi dari LPS. Hasil penelitian ini menunjukkan LPS B.abortus S 19 dapat dideteksi pada kadar 270,8).1g dengan uji indirect sandwich ELISA dan pada kadar 10 pg dengan uji dot blot serta menunjukkan adanya perbedaan determinan antigen antara LPS B.abortus S19 dan LPS E.coli.