Karakteristik Freeze Dried Amniotic Membrane Stem Cell Metabolite Product Dan Evaluasi Penetrasi Kulit Dengan Penambahan Space-Peptide

• Main Author: Diah Indah Kumala Sari
• Format: Theses and Dissertations NonPeerReviewed
• Language: Indonesian; Indonesian; Indonesian; Indonesian; Indonesian; Indonesian; Indonesian; Indonesian; Indonesian; Indonesian; Indonesian; Indonesian
• Published: 2020
• Subjects: Including massage, exercise, occupational therapy, hydrotherapy, phototherapy, radiotherapy, thermotherapy, electrotherapy
• Online Access: http://repository.unair.ac.id/97483/1/1.%20HALAMAN%20JUDUL%20KKC%20KK%20TF.08-20%20Sar%20k.pdf; http://repository.unair.ac.id/97483/2/2.%20ABSTRACT%20KKC%20KK%20TF.08-20%20Sar%20k.pdf; http://repository.unair.ac.id/97483/3/3.%20DAFTAR%20ISI%20KKC%20KK%20TF.08-20%20Sar%20k.pdf; http://repository.unair.ac.id/97483/4/4.%20BAB%201PENDAHULUAN%20KKC%20KK%20TF.08-20%20Sar%20k.pdf; http://repository.unair.ac.id/97483/5/5.%20BAB%202TINJAUAN%20PUSTAKA%20KKC%20KK%20TF.08-20%20Sar%20k.pdf; http://repository.unair.ac.id/97483/6/6.%20BAB%203KERANGKA%20KONSEPTUAL%20KKC%20KK%20TF.08-20%20Sar%20k.pdf; http://repository.unair.ac.id/97483/7/7.%20BAB%204METODOLOGI%20PENELITIAN%20KKC%20KK%20TF.08-20%20Sar%20k.pdf; http://repository.unair.ac.id/97483/8/8.%20BAB%205HASIL%20PENELITIAN%20KKC%20KK%20TF.08-20%20Sar%20k.pdf; http://repository.unair.ac.id/97483/9/9.%20BAB%206PEMBAHASAN%20KKC%20KK%20TF.08-20%20Sar%20k.pdf; http://repository.unair.ac.id/97483/10/10.%20BAB%207KESIMPULAN%20DAN%20SARAN%20KKC%20KK%20TF.08-20%20Sar%20k.pdf; http://repository.unair.ac.id/97483/11/11.%20DAFTAR%20PUSTAKA%20KKC%20KK%20TF.08-20%20Sar%20k.pdf; http://repository.unair.ac.id/97483/12/12.%20Lampiran%20KKC%20KK%20TF.08-20%20Sar%20k.pdf; http://repository.unair.ac.id/97483/
• Institution: Universitas Airlangga

Penuaan merupakan proses multifaktorial yang menyebabkan perubahan struktural dan fisiologis pada setiap lapisan kulit, yang ditandai dengan kerutan halus, perubahan pigmentasi, warna kulit pucat, perubahan tekstur dan hilangnya elastisitas (Draelos, 2016). Terapi penuaan bertujuan untuk mengurangi perubahan struktural dan fisiologis pada kulit. Terapi penuaan dapat dilakukan secara invasif maupun non invasif. Terapi invasif merupakan terapi berupa pembedahan kecil pada prosesnya, sedangkan terapi non-invasif merupakan terapi yang menggunakan bahan-bahan topikal anti aging seperti Amniotic Membrane Stem Cell Metabolite Product (AMSCMP) (Prakoeswa, 2018). AMSCMP adalah metabolit berfasa fluid mengandung growth factor berupa protein antara lain Epidermal Growth Factor (EGF), basic Fibroblast Growth Factor (bFGF), Transforming Growth Factor-β (TGF-β) dan Keratinocyte Growth Factor (KGF) (Islam R, 2012). Diketahui bahwa protein tidak stabil dalam komponen air dan berpengaruh langsung terhadap stabilitas penyimpanan karena merupakan media yang baik bagi perumbuhan mikroba. Sehingga diperlukan penanganan khusus untuk menjaga stabilitas growth factor yang ada dengan cara freeze dry. Freeze dry merupakan metode pengubahan bentuk fluid menjadi kering (dried) dengan menggunakan suhu rendah sehingga baik untuk senyawa termolabil seperti AMSCMP. Freeze dry menghasilkan sediaan dalam bentuk kering sehingga lebih stabil pada penyimpanan (Nathdanai, 2012; Davinder, 2015). Kemudian dilakukan studi stabilitas penyimpanan terhadap suhu ruang dan dingin selama 28 hari, pH, penentuan kadar TGF-β pada hari ke-0 dan 21, serta penentuan Berat Molekul (BM) antar fluid dan freeze dried AMSCMP. Diperoleh hasil bahwa freeze dried lebih stabil terhadap suhu ruang dan dingin, memiliki nilai pH 7-7,4 kadar TGF-β stabil selama 21 hari, dan memiliki BM yang sama antara fluid dan freeze dried yaitu 75,33 kilodalton (kDa). Setelah diperoleh hasil bahwa freeze dried AMSCMP lebih stabil kemudian dilakukan uji karakterisasi fisik sebagai skrining awal untuk selanjutnya digunakan sebagai formula antara lain Scanning Electron Microscope (SEM) yang ditunjukkan bahwa morfologi permukaan berbentuk kristal tetragonal. X-Ray Diffraction (XRD) memiliki puncak serapan yang tajam pada sudut 2θ 31,59; 45,35 dan 56,39. Fourier Transform Infreared (FTIR) memiliki gugus karakteristik protein yaitu N-H Amida III pada wavenumber (1400- 1360cm-1) dan C=O (1675-1640cm-1), dan Differential Thermal Analysis (DTA) menunjukkan suhu lebur 163,8⁰C dengan entalpi 305 J/g. Sebagian besar growth factor yang ada pada AMSCMP merupakan molekul hidrofilik yang berukuran besar > 25.000 Dalton (Da), sedangkan molekul hidrofilik yang berukuran >500 Da sulit untuk penetrasi ke dalam kulit (Prakoeswa, 2018). Sehingga untuk meningkatkan sifat penetrasinya diperlukan penambahan enhancer khusus dari golongan peptida yaitu Skin Penetrating and Cell Entering (SPACE) (Kumar, 2015). Penelitian ini membandingkan pengaruh peningkatan kadar SPACE Peptida terhadap penetrasi ke dalam kulit dengan perbandingan formula freeze dried AMSCMP: SPACE (F1 = 1:0; F2 = 1:1; F3 = 1:2; dan F4 = 1:3) terhadap beberapa parameter yakni penentuan kadar TGF-β, berat molekul, penetrasi dan iritasi. Penentuan kadar TGF-β yang dilakukan pada hari ke-0 dan ke-21 menujukkan adanya penurunan namun tidak berbeda bermakna antar formula. Hasil pengujian BM protein AMSCMP menunjukkan angka 75,33 kDa. Uji penetrasi dilakukan secara in vivo menggunakan kulit punggung mencit pada jam ke-1, 3, dan 5. Hasil uji penetrasi selama 1 jam menunjukkan bahwa formula 4 (1:3) memiliki kemampuan penetrasi yang paling dalam dibandingkan dengan formula lainnya, baik pada saat jam ke-3 mapun ke-5. Uji iritasi dilakukan secara in vivo dengan menggunakan kulit punggung mencit yang diaplikasikan selama 24 jam. Hasil skoring uji iritasi menunjukkan bahwa F1 dan F2 tidak memiliki nilai iritasi, sedangkan F3 dan F4 memiliki nilai skor iritasi dengan parameter Polymorpho Nuclear (PMN), Degeneratif, dan Edema. Namun nilai iritasi tergolong sangat ringan, sehingga masih diperbolehkan dengan batasan tertentu. Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa freeze dried memiliki stabilitas penyimpanan maupun kadar TGF-β lebih stabil dibandingkan bentuk fluid nya, namun penentuan pH dan BM memiliki hasil yang tidak berbeda. freeze dried AMSCMP memiliki morfologi permukaan berbentuk kristal tetragonal, puncak serapan yang tajam pada sudut 2θ 31,59; 45,35 dan 56,39, memiliki gugus karakteristik protein yaitu N-H Amida III pada wavenumber (1400-1360cm-1) dan C=O (1675-1640cm-1) serta suhu lebur 163,8⁰C dengan entalpi 305 J/g. Penggunaan SPACE sebagai peningkat penetrasi diketahui bahwa pada dosis rendah F2 (1:1) dapat memberikan efek penetrasi yang maksimal sehingga diperlukan studi lebih lanjut untuk mengetahui dosis terkecil yang dapat digunakan sebagai sediaan topikal antiaging.