Development of somatic cell nuclear transfer techique for biomedical and agricultural research : report

To develop somatic cell nuclear transfer by using the rabbit as a mode in biomedical and agricultural research. The experiments are described in nine chapters: Chapter 1: Introduction, Chapter 2: Superovulation and oocyte recipient production in rabbits, Chapter 3: A technique for adult and foetal f...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Main Authors: Mongkol Techakumphu, Pranee Numchaisrika, Ratajuk Rungsiwiwat, Somchai Suwajanakorn, Kamtorn Pruksananonda, Pramuan Virutamasen
Other Authors: Chulalongkorn University. Faculty of Veterinary Science
Format: Technical Report
Language:English
Published: Chulalongkorn University 2009
Subjects:
Online Access:http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/11882
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Institution: Chulalongkorn University
Language: English
id th-cuir.11882
record_format dspace
institution Chulalongkorn University
building Chulalongkorn University Library
country Thailand
collection Chulalongkorn University Intellectual Repository
language English
topic Cell nuclei
Somatic cells
Embryo transplantation
Rabbits
spellingShingle Cell nuclei
Somatic cells
Embryo transplantation
Rabbits
Mongkol Techakumphu
Pranee Numchaisrika
Ratajuk Rungsiwiwat
Somchai Suwajanakorn
Kamtorn Pruksananonda
Pramuan Virutamasen
Development of somatic cell nuclear transfer techique for biomedical and agricultural research : report
description To develop somatic cell nuclear transfer by using the rabbit as a mode in biomedical and agricultural research. The experiments are described in nine chapters: Chapter 1: Introduction, Chapter 2: Superovulation and oocyte recipient production in rabbits, Chapter 3: A technique for adult and foetal fibroblast cell culture, for donor cell preparation in somatic nuclear transfer, Chapter 4: Preliminary studies on somatic cell nuclear transfer in rabbits, Chapter 5: In vitro development of rabbit cloned embryos using adult fibroblast cells, after post-activation treatment with cyelohexamide and 6-dimethlylaminopurine, Chapter 6: Development of rabbit cloned embryos using cumulus cells, serum-starved and non-starved fibroblast cells, as the donor nucleus, Chapter 7: Development of cloned embryos from adult and foetal rabbit fibroblast cells, Chapter 8: A comparison of cell fusion technique and intracytoplasmic donor cell injection for producing cloned rabbit embryos, Chapter 9: Conclusion. In conclusion, the whole processes of somatic nuclear transfer using cell fusion technique was developed. This included recipient oocyte preparation, donor cell preparation, enucleation of recipient oocytes, fusion and activation, nuclear transfer and in vitro culture of cloned oocytes to the morula and blastocyst stage. A failure of in vitro development was observed when using intracytoplasmic donor cell injection in both mice or rabbits. Further studies will focus on the type of donor cells and interspecies cloning, embryonic stem cell development and the application of nuclear transfer in endangered species.
author2 Chulalongkorn University. Faculty of Veterinary Science
author_facet Chulalongkorn University. Faculty of Veterinary Science
Mongkol Techakumphu
Pranee Numchaisrika
Ratajuk Rungsiwiwat
Somchai Suwajanakorn
Kamtorn Pruksananonda
Pramuan Virutamasen
format Technical Report
author Mongkol Techakumphu
Pranee Numchaisrika
Ratajuk Rungsiwiwat
Somchai Suwajanakorn
Kamtorn Pruksananonda
Pramuan Virutamasen
author_sort Mongkol Techakumphu
title Development of somatic cell nuclear transfer techique for biomedical and agricultural research : report
title_short Development of somatic cell nuclear transfer techique for biomedical and agricultural research : report
title_full Development of somatic cell nuclear transfer techique for biomedical and agricultural research : report
title_fullStr Development of somatic cell nuclear transfer techique for biomedical and agricultural research : report
title_full_unstemmed Development of somatic cell nuclear transfer techique for biomedical and agricultural research : report
title_sort development of somatic cell nuclear transfer techique for biomedical and agricultural research : report
publisher Chulalongkorn University
publishDate 2009
url http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/11882
_version_ 1681413082893516800
spelling th-cuir.118822009-12-21T11:52:04Z Development of somatic cell nuclear transfer techique for biomedical and agricultural research : report การพัฒนาเทคนิคการย้ายฝากนิวเคลียสของเซลล์โซมาติกเพื่องานวิจัยทางการแพทย์และการเกษตร ปีที่ 1 Mongkol Techakumphu Pranee Numchaisrika Ratajuk Rungsiwiwat Somchai Suwajanakorn Kamtorn Pruksananonda Pramuan Virutamasen Chulalongkorn University. Faculty of Veterinary Science Chulalongkorn University. Faculty of Veterinary Science Chulalongkorn University. Faculty of Veterinary Science Chulalongkorn University. Faculty of Veterinary Science Chulalongkorn University. Faculty of Veterinary Science Chulalongkorn University. Faculty of Veterinary Science Cell nuclei Somatic cells Embryo transplantation Rabbits To develop somatic cell nuclear transfer by using the rabbit as a mode in biomedical and agricultural research. The experiments are described in nine chapters: Chapter 1: Introduction, Chapter 2: Superovulation and oocyte recipient production in rabbits, Chapter 3: A technique for adult and foetal fibroblast cell culture, for donor cell preparation in somatic nuclear transfer, Chapter 4: Preliminary studies on somatic cell nuclear transfer in rabbits, Chapter 5: In vitro development of rabbit cloned embryos using adult fibroblast cells, after post-activation treatment with cyelohexamide and 6-dimethlylaminopurine, Chapter 6: Development of rabbit cloned embryos using cumulus cells, serum-starved and non-starved fibroblast cells, as the donor nucleus, Chapter 7: Development of cloned embryos from adult and foetal rabbit fibroblast cells, Chapter 8: A comparison of cell fusion technique and intracytoplasmic donor cell injection for producing cloned rabbit embryos, Chapter 9: Conclusion. In conclusion, the whole processes of somatic nuclear transfer using cell fusion technique was developed. This included recipient oocyte preparation, donor cell preparation, enucleation of recipient oocytes, fusion and activation, nuclear transfer and in vitro culture of cloned oocytes to the morula and blastocyst stage. A failure of in vitro development was observed when using intracytoplasmic donor cell injection in both mice or rabbits. Further studies will focus on the type of donor cells and interspecies cloning, embryonic stem cell development and the application of nuclear transfer in endangered species. พัฒนาเทคนิคการย้ายฝากนิวเคลียสของเซลล์โซมาติกเพื่องานวิจัยทางการแพทย์และการเกษตร โดยใช้กระต่ายเป็นต้นแบบในการพัฒนา รายงานวิจัยนี้แบ่งเป็น 9 บท ดังนี้ บทที่ 1 บทนำ บทที่ 2 การกระตุ้นเพิ่มการตกไข่และการผลิตโอโอไซต์ตัวรับในกระต่าย บทที่ 3 เทคนิคในการเลี้ยงเซลล์ไฟโบรบาลาสต์จากกระต่ายที่โตเต็มวัยและฟีตัสเพื่อใช้ในการย้ายฝากเซลล์โซมาติกนิวเคลียส บทที่ 4 การศึกษาเบื้องต้นการย้ายฝากนิวเคลียสด้วยเซลล์โซมาติกในกระต่าย บทที่ 5 การพัฒนาในหลอดทดลองของตัวอ่อนกระต่ายที่ได้จากการโคลนโดยใช้เซลล์ไฟโปรลาสต์จากกระต่ายที่โตเต็มวัยภายหลังการกระตุ้นด้วยไฟฟ้าร่วมกับสาร cyelohexamide และ 6-dimethlylarninopurine บทที่ 6 การพัฒนาของตัวอ่อนกระต่ายโดยที่ได้จากการโคลนโดยใช้เซลล์คิวมูลัส และเซลล์ไฟโบรบลาสต์ที่อดอาหารและไม่อดอาหาร เป็นตัวให้นิวเคลียส บทที่ 7 การพัฒนาของตัวอ่อนจากที่ได้จากการโคลนโดยใช้เซลล์ไฟโบรบลาสต์จากกระต่ายที่โตเต็มวัยและจากฟีตัส บทที่ 8 การเปรียบเทียบการผลิตตัวอ่อนกระต่ายจากการโคลนด้วยวิธีการเชื่อมเซลล์และการฉีดนิวเคลียสเข้าเซลล์ บทที่ 9 สรุป สรุปจากการศึกษาครั้งนี้ได้พัฒนาการย้ายฝากเซลล์โซมาติกนิวเคลียส ซึ่งประกอบด้วยวิธีการเตรียมโอโอไซต์ตัวรับ วิธีการเตรียมนิวเคลียสตัวให้ วิธีการดูดเอาสารพันธุกรรมออกจากเซลล์ตัวรับ การเชื่อมและการกระตุ้นเซลล์ให้หลอมรวมกัน การย้ายฝากเซลล์ตัวให้ไปยังเซลล์ตัวรับ และการเลี้ยงโคลนตัวอ่อนในหลอดทดลอง จนถึงระยะมอรูลาและบลาสโตซีส อย่างไรก็ตามพบว่าการใช้เทคนิคกรฉีดนิวเคลียสเข้าเซลล์เหมาะสมในการผลิตโคลนตัวอ่อนทั้งในหนูเมาส์และกระต่าย งานวิจัยที่จะพัฒนาต่อไปคือ การศึกษาชนิดของเซลล์ตัวให้ชนิดต่างๆ ต่อการพัฒนาของโคลนตัวอ่อน การศึกษาการโคลนตัวอ่อนข้ามสายพันธุ์สัตว์ การศึกษาด้านเซลล์ต้นแบบโดยร่วมกับเทคนิคการย้ายฝากนิวเคลียส รวมทั้งการศึกษาย้ายฝากนิวเคลียสในสัตว์ที่ใกล้จะสูญพันธุ์ Ratchadaphiseksomphot Endowment Fund 2009-12-21T11:52:03Z 2009-12-21T11:52:03Z 2004 Technical Report http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/11882 en Chulalongkorn University 6080541 bytes application/pdf application/pdf Chulalongkorn University