Effect of thrombin and par-1 on OPG and RANKL expression in human periodontal ligament cells
Thesis (Ph.D.)--Chulalongkorn University, 2007
Saved in:
| Main Author: | |
|---|---|
| Other Authors: | |
| Format: | Theses and Dissertations |
| Language: | English |
| Published: |
2012
|
| Subjects: | |
| Online Access: | http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/19770 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Institution: | Chulalongkorn University |
| Language: | English |
| id |
th-cuir.19770 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
th-cuir.197702012-05-20T07:53:28Z Effect of thrombin and par-1 on OPG and RANKL expression in human periodontal ligament cells ผลของทรอมบินและพาร์วันต่อการแสดงออกของออสติโอโพรติจิลินและแรงค์ไลแกนต่อเซลล์เพาะเลี้ยงจากเอ็นยึดปริทันต์ของมนุษย์ Uthaiwan Arayatrakoollikit Prasit Pavasant Tussanee Yongchaitrakul Periodontal ligament Thrombin Receptor, PAR-1 Osteoprotegerin RANK Ligand Thesis (Ph.D.)--Chulalongkorn University, 2007 Thrombin influences the biological behavior of human periodontal ligament cells (HPDL) and plays multiple roles in the early stage of bone healing. Osteoprotegerin (OPG) and receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL) are two key molecules that regulate bone homeostasis. The balance of RANKL and OPG in the tissue is one of the factors significant in the mechanism of hard tissue destruction and remodeling. However, the specific role of thrombin on balance of RANKL and OPG has not been studied. In the present study, we investigated the effect of thrombin on RANKL and OPG synthesis. The participation of PAR-1 and the signaling pathways mediate by thrombin are focused. Our result showed that thrombin profoundly induced protein synthesis of OPG at 0.1 U/ml. The inductive effect was inhibited by cycloheximide, but not by indomethacin. Phosphatidylinositol 3’kinase (PI3K) inhibitor, LY294002 and mammalian target of rapamycin (mTOR) inhibitor, rapamycin, exerted the inhibitory effect on the thrombin induced OPG synthesis. In addition, the thrombin-induced OPG synthesis was inhibited by protease-activated receptor (PAR) -1 antagonist. Activation of phospho-Akt (p-Akt) was observed and the effect was abolished by LY294002. In conclusion, this study was the first to demonstrate that thrombin induce OPG synthesis in HPDL cells post-transcriptionally, possibly through PAR-1. The regulation was through PI3K/Akt and mTOR pathway. This finding suggests that thrombin may play a significant role in alveolar bone repair and homeostasis of periodontal tissue, partly through RANKL/OPG system. ทรอมบินมีอิทธิพลต่อพฤติกรรมทางชีวภาพของเซลล์เพาะเลี้ยงจากเอ็นยึดปริทันต์ของมนุษย์และมีบทบาทสำคัญในการเกิดการซ่อมแซมของกระดูกในระยะแรก ออสติโอโพรติจิลิน (โอพีจี) และแรงค์ไลแกนเป็นสารสองตัวที่มีบทบาทสำคัญในการควบคุมการเกิดสมดุลของกระดูก สมดุลของโอพีจีและแรงค์ไลแกนในเนื้อเยื่อเป็นปัจจัยหนึ่งที่มีบทบาทสำคัญในกลไกการเกิดการทำลายและการสร้างใหม่ของเนื้อเยื่อแข็ง อย่างไรก็ตามยังไม่เคยมีรายงานการศึกษาถึงบทบาทของทรอมบินที่มีต่อสมดุลของโอพีจีและแรงค์ไลแกนในเซลล์เพาะเลี้ยงจากเอ็นยึดปริทันต์ของมนุษย์ ดังนั้นในการศึกษาครั้งนี้ ได้ทำการศึกษาผลของทรอมบินที่มีต่อการแสดงออกและการสังเคราะห์โปรตีนโอพีจีและแรงค์ไลแกนในเซลล์เพาะเลี้ยงจากเอ็นยึดปริทันต์ของมนุษย์ รวมทั้งศึกษาถึงการส่งสัญญาณผ่านทรอมบินรีเซพเตอร์หรือพาร์ และกลไกการส่งสัญญาณต่าง ๆ ภายในเซลล์ ผลการศึกษาพบว่าทรอมบินที่ความเข้มข้น 0.1 ยูนิตต่อมิลลิลิตร สามารถกระตุ้นให้เกิดการสังเคราะห์โปรตีนโอพีจีเพิ่มขึ้นอย่างชัดเจน ซึ่งผลดังกล่าวสามารถถูกยับยั้งได้ด้วยสารไซโคลเฮกซิไมด์ แต่ไม่สามารถยับยั้งได้ด้วยสาร แอคติโนมัยซินดี ผลจากการใช้สารยับยั้งต่อฟอสฟาติดิลอิโนสิทอลทรีไคเนส (พีไอทรีเค, แอลวาย294002) และแมมมาเลียนทาร์เก็ทอ็อฟราปาไมซิน (เอ็มทอร์) พบว่าสามารถยับยั้งการเพิ่มขึ้นของโปรตีนโอพีจีได้ และยังพบว่าแอลวาย 294002 สามารถยับยั้งการกระตุ้นการทำงานของเอเคที (ระดับฟอสโฟเอเคที)ได้เช่นเดียวกัน นอกจากนี้ผลการทดลองยังพบว่าพาร์วันแอนตาโกนิสท์สามารถยับยั้งการเพิ่มโอพีจีจากการเหนี่ยวนำของ ทรอมบิน โดยสรุป งานวิจัยในครั้งนี้แสดงให้เห็นว่าทรอมบินกระตุ้นการเพิ่มขึ้นของโปรตีนโอพีจีในเซลล์เพาะเลี้ยงจากเอ็นยึดปริทันต์ของมนุษย์เป็นไปได้ที่จะเกิดผ่านทางพาร์วัน และเป็นกลไกที่เกิดภายหลังกระบวนการทรานสคริพชันถ่ายทอดสัญญาณภายในเซลล์ผ่านทางพีไอทรีเค เอเคที และเอ็มทอร์ ตามลำดับ การศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่าทรอมบินน่าจะมีบทบาทสำคัญในการควบคุมสมดุลของกระดูกและการซ่อมแซมของกระดูกผ่านทางระบบแรงค์ไลแกนและโอพีจี 2012-05-20T07:53:27Z 2012-05-20T07:53:27Z 2007 Thesis http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/19770 en Chulalongkorn University 2388637 bytes application/pdf application/pdf |
| institution |
Chulalongkorn University |
| building |
Chulalongkorn University Library |
| country |
Thailand |
| collection |
Chulalongkorn University Intellectual Repository |
| language |
English |
| topic |
Periodontal ligament Thrombin Receptor, PAR-1 Osteoprotegerin RANK Ligand |
| spellingShingle |
Periodontal ligament Thrombin Receptor, PAR-1 Osteoprotegerin RANK Ligand Uthaiwan Arayatrakoollikit Effect of thrombin and par-1 on OPG and RANKL expression in human periodontal ligament cells |
| description |
Thesis (Ph.D.)--Chulalongkorn University, 2007 |
| author2 |
Prasit Pavasant |
| author_facet |
Prasit Pavasant Uthaiwan Arayatrakoollikit |
| format |
Theses and Dissertations |
| author |
Uthaiwan Arayatrakoollikit |
| author_sort |
Uthaiwan Arayatrakoollikit |
| title |
Effect of thrombin and par-1 on OPG and RANKL expression in human periodontal ligament cells |
| title_short |
Effect of thrombin and par-1 on OPG and RANKL expression in human periodontal ligament cells |
| title_full |
Effect of thrombin and par-1 on OPG and RANKL expression in human periodontal ligament cells |
| title_fullStr |
Effect of thrombin and par-1 on OPG and RANKL expression in human periodontal ligament cells |
| title_full_unstemmed |
Effect of thrombin and par-1 on OPG and RANKL expression in human periodontal ligament cells |
| title_sort |
effect of thrombin and par-1 on opg and rankl expression in human periodontal ligament cells |
| publishDate |
2012 |
| url |
http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/19770 |
| _version_ |
1681412427767349248 |