การสร้างดีเอ็นเอติดตามพอลิฟอสเฟตไคเนสในแบคทีเรียสะสมพอลิฟอสเฟต ที่แยกจากระบบบำบัดน้ำเสียสี่พระยา
วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2547
Saved in:
| Main Author: | |
|---|---|
| Other Authors: | |
| Format: | Theses and Dissertations |
| Language: | Thai |
| Published: |
จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย
2007
|
| Subjects: | |
| Online Access: | http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/3430 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Institution: | Chulalongkorn University |
| Language: | Thai |
| id |
th-cuir.3430 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
th-cuir.34302007-12-20T07:55:38Z การสร้างดีเอ็นเอติดตามพอลิฟอสเฟตไคเนสในแบคทีเรียสะสมพอลิฟอสเฟต ที่แยกจากระบบบำบัดน้ำเสียสี่พระยา Construction of DNA probe for polyphosphate kinase in polyphosphate accumulating bacteria isolated from Si Praya wastewater treatment system ปวีณา รัตนมาศ, 2522- กอบชัย ภัทรกุลวณิชย์ ชาญวิทย์ โฆษิตานนท์ จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย. คณะวิทยาศาสตร์ น้ำเสีย--การบำบัด--การกำจัดฟอสฟอรัส แบคทีเรีย--การเพาะเลี้ยงและอาหารเพาะเชื้อ โพลิฟอสเฟต วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2547 งานวิจัยนี้ได้คัดแยกแบคทีเรียจากตัวอย่างน้ำเสียที่มีความสามารถในการสะสมพอลิฟอสเฟตไว้ภายในเซลล์จากโรงบำบัดน้ำเสียสี่พระยา กรุงเทพมหานคร ด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อน้ำเสีย จำนวน 5 สายพันธุ์ คือ CU-PK1, CU-PK2, CU-PK3, CU-PK4 และ CU-PK 5 หาความสามารถในการสังเคราะห์พอลิฟอสเฟตโดยการติดตามกิจกรรมเอนไซม์พอลิฟอสเฟตไคเนส พบว่าทั้ง 5 สายพันธุ์มีกิจกรรมของพอลิฟอสเฟตไคเนสโดยที่สายพันธุ์ CU-PK2 มีความสามารถในการสังเคราะห์พอลิฟอสเฟตสูงสุด เมื่อเพิ่มจำนวนยีน ppk ด้วยปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส โดยใช้ดีเจเนอเรตไพร์เมอร์ ที่มีความจำเพาะต่อ ppk พบว่าสามารถเพิ่มจำนวนชิ้นส่วนของยีน ppk ได้ใน CU-PK2, CU-PK5 และ Escherichia coli JM109 ซึ่งเป็นตัวควบคุมผลบวก โดยได้ผลิตภัณฑ์ขนาดประมาณ 1300 bp นำชิ้นดีเอ็นเอที่เพิ่มจำนวนได้มาติดฉลากด้วย Digoxygenin และใช้เป็นดีเอ็นเอติดตามยีน ppk ในแบคทีเรียทั้ง 5 สายพันธุ์ด้วยวิธี dot blot hybridization พบว่าตัวติดตามดีเอ็นเอทั้งสามชนิดเกิดสัญญาณไฮบริไดซ์กับ จีโนมิกดีเอ็นเอ CU-PK2, CU-PK5 และ E.coli JM109 เหมือนกัน แต่ไม่เกิดสัญญาณกับสายพันธุ์ CU-PK1, CU-PK3 และ CU-PK4 การจำแนกสายพันธุ์เบื้องต้นของ CU-PK2 และCU-PK5 โดยอาศัยลักษณะทางสัณฐานวิทยาและข้อมูลลำดับนิวคลีโอไทด์ของ 16S rDNA พบว่าลำดับนิวคลีโอไทด์ของ CU-PK2 มีความคล้ายคลึงกับ Klebsiella oxytoca และ CU-PK 5 มีความคล้ายคลึงกับ Enterobacter aerogenes Five phosphate accumulating bacteria strains, CU-PK1, CU-PK2, CU-PK3, CU-PK4 and CU-PK 5 were isolated from wastewater samples of Si Praya wastewater treatment system by using wastewater medium. Polyphosphate synthesis activity was assessed by monitoring the activity of polyphosphate kinase. The result revealed that all five strains have polyphosphate kinase activity whereas the strain CU-PK2 shows the highest activity. After ppk amplification by polymerase chain reaction using degenerated primers specific to ppk, the 1300 bp product can be observed when using genomic DNA of CU-PK2, CU-PK5 and Escherichia coli JM109 as template. The PCR products were labeled with Digoxygenin and used as DNA probe for detection of ppk of the 5 bacterial strains using dot blot hybridization. Only genomic DNA from the strain CU-PK2, CU-PK5 and E. coli JM109 showed the positive hybridization signals with those synthesized probes. The strain CU-PK2 and CU-PK5 were preliminary identified based on their morphological characteristics and 16S rDNA nucleotide sequences to be Klebsiella oxytoca and Enterobacter aerogenes, respectively. 2007-02-15T07:04:18Z 2007-02-15T07:04:18Z 2547 Thesis 9745310115 http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/3430 th จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย 1236149 bytes application/pdf application/pdf จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย |
| institution |
Chulalongkorn University |
| building |
Chulalongkorn University Library |
| country |
Thailand |
| collection |
Chulalongkorn University Intellectual Repository |
| language |
Thai |
| topic |
น้ำเสีย--การบำบัด--การกำจัดฟอสฟอรัส แบคทีเรีย--การเพาะเลี้ยงและอาหารเพาะเชื้อ โพลิฟอสเฟต |
| spellingShingle |
น้ำเสีย--การบำบัด--การกำจัดฟอสฟอรัส แบคทีเรีย--การเพาะเลี้ยงและอาหารเพาะเชื้อ โพลิฟอสเฟต ปวีณา รัตนมาศ, 2522- การสร้างดีเอ็นเอติดตามพอลิฟอสเฟตไคเนสในแบคทีเรียสะสมพอลิฟอสเฟต ที่แยกจากระบบบำบัดน้ำเสียสี่พระยา |
| description |
วิทยานิพนธ์ (วท.ม.)--จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย, 2547 |
| author2 |
กอบชัย ภัทรกุลวณิชย์ |
| author_facet |
กอบชัย ภัทรกุลวณิชย์ ปวีณา รัตนมาศ, 2522- |
| format |
Theses and Dissertations |
| author |
ปวีณา รัตนมาศ, 2522- |
| author_sort |
ปวีณา รัตนมาศ, 2522- |
| title |
การสร้างดีเอ็นเอติดตามพอลิฟอสเฟตไคเนสในแบคทีเรียสะสมพอลิฟอสเฟต ที่แยกจากระบบบำบัดน้ำเสียสี่พระยา |
| title_short |
การสร้างดีเอ็นเอติดตามพอลิฟอสเฟตไคเนสในแบคทีเรียสะสมพอลิฟอสเฟต ที่แยกจากระบบบำบัดน้ำเสียสี่พระยา |
| title_full |
การสร้างดีเอ็นเอติดตามพอลิฟอสเฟตไคเนสในแบคทีเรียสะสมพอลิฟอสเฟต ที่แยกจากระบบบำบัดน้ำเสียสี่พระยา |
| title_fullStr |
การสร้างดีเอ็นเอติดตามพอลิฟอสเฟตไคเนสในแบคทีเรียสะสมพอลิฟอสเฟต ที่แยกจากระบบบำบัดน้ำเสียสี่พระยา |
| title_full_unstemmed |
การสร้างดีเอ็นเอติดตามพอลิฟอสเฟตไคเนสในแบคทีเรียสะสมพอลิฟอสเฟต ที่แยกจากระบบบำบัดน้ำเสียสี่พระยา |
| title_sort |
การสร้างดีเอ็นเอติดตามพอลิฟอสเฟตไคเนสในแบคทีเรียสะสมพอลิฟอสเฟต ที่แยกจากระบบบำบัดน้ำเสียสี่พระยา |
| publisher |
จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย |
| publishDate |
2007 |
| url |
http://cuir.car.chula.ac.th/handle/123456789/3430 |
| _version_ |
1681409165721862144 |