PEMURNIAN PARSIAL DAN KARAKTERISASI ENZIM PEKTINASE DARI BAKTERI TERMOFILIK ASAL SUMBER AIR PANAS GUNUNG PANCAR BOGOR

• Main Author: KARLINA WIDOSARI, 081211532008
• Format: Theses and Dissertations NonPeerReviewed
• Language: Indonesian; Indonesian
• Published: 2016
• Subjects: QD71-142 Analytical chemistry; QR75-99.5 Bacteria
• Online Access: http://repository.unair.ac.id/54140/1/MPK.49-16%20Wid%20p%20abstrak.pdf; http://repository.unair.ac.id/54140/2/MPK.49-16%20Wid%20p.pdf; http://repository.unair.ac.id/54140/; http://lib.unair.ac.id
• Institution: Universitas Airlangga

Pada penelitian ini dilakukan pemurnian enzim pektinase dari isolat bakteri termofilik asal sumber air panas Gunung Pancar, Bogor (P4), dengan tujuan untuk menentukan derajat kemurnian enzim tersebut pada setiap tahap pemurnian pengendapan dengan garam amonium sulfat, dialisis, dan kromatografi penukar ion, serta menentukan estimasi masa molekul relatif enzim pektinase. Langkah awal untuk penelitian ini adalah peremajaan bakteri yang selanjutnya dilakukan produksi pektinase, kemudian pengendapan amonium sulfat dengan kejenuhan 80%. Sehingga diperoleh pelet yang selanjutnya dilarutkan dengan bufer fosfat sitrat pH 6 untuk dilanjutkan dengan proses dialisis. Tahap selanjutnya adalah kromatografi penukar ion untuk pemisahan enzim berdasarkan muatannya. Eluen yang digunakan adalah NaCl [0-0,5] M dalam buffer Tris HCl pH 7 secara bergradien dari konsentrasi rendah ke konsentrasi tinggi. Matriks yang digunakan adalah matriks DEAE-toyopearl 650 M dalam etanol. Hasil terbaik pemurnian dengan kromatografi penukar ion terdapat dalam fraksi ke-6 dan ke-7 dengan derajat kemurnian 31,404 kali dari ekstrak kasarnya. Estimasi massa molekul relatif enzim pektinase dengan analisis SDS-PAGE dan zimogram. Hasil SDS-PAGE dan zimogram ini menunjukkan bahwa pektinase tersebut memiliki estimasi massa molekul relatif sebesar 47.55 kDa. Kata kunci: enzim pektinase, bakteri termofil, derajat kemurnian, karakterisasi