Tách dòng và đồng biểu hiện gen mã hóa hai loại kháng nguyên vỏ GP5ecto (vùng ngoại bào) và M của virus gây hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn
Hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn (Porcine reproductive and respiratory syndrome - PRRS) là một loại bệnh truyền nhiễm phổ biến trong chăn nuôi lợn, do virus PRRS (PRSSV) gây ra. Protein GP5 (ORF5) là glycoprotein vỏ ngoài, bao gồm vùng ngoại bào (ectodomain) và vùng nội bào (endo...
Saved in:
| Main Authors: | , , , , , |
|---|---|
| Format: | Article |
| Language: | Vietnamese |
| Published: |
Đại học Quốc gia Hà Nội
2017
|
| Subjects: | |
| Online Access: | http://repository.vnu.edu.vn/handle/VNU_123/60748 https://doi.org/10.25073/2588-1140/vnunst.4588 |
| Tags: |
Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
|
| Institution: | Vietnam National University, Hanoi |
| Language: | Vietnamese |
| Summary: | Hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn (Porcine reproductive and respiratory
syndrome - PRRS) là một loại bệnh truyền nhiễm phổ biến trong chăn nuôi lợn, do virus PRRS
(PRSSV) gây ra. Protein GP5 (ORF5) là glycoprotein vỏ ngoài, bao gồm vùng ngoại bào
(ectodomain) và vùng nội bào (endodomain). Protein M (ORF6) là protein cấu trúc bảo thủ nhất
của virus và không bị glycosyl hóa. Protein GP5 và M liên kết chặt chẽ với nhau bằng cầu disulfit
giúp cho việc lắp ráp và lây nhiễm của virus. Sự biểu hiện đồng thời của protein GP5 và M có thể
phát triển phản ứng miễn dịch mạnh hơn. Trong nghiên cứu này, hai đoạn gen mã hóa cho protein
GP5ecto (vùng ngoại bào) và M của chủng virus PRRS (VN07196) được khuếch đại riêng lẻ. Hai
đoạn gen này sau đó được ghép nối với nhau bằng kỹ thuật PCR lồng sử dụng các căp mồi đặc
hiệu; được gắn kết với promoter 35S, Histag và Cmyc, ELP; nhân dòng trong vector pRTRA và
thiết kế vào cấu trúc vetor chuyển gen thực vật pCB301. Protein tái tổ hợp GP5ecto-M gắn kết
ELP được biểu hiện thành công trong lá cây thuốc lá N. benthamiana bằng công nghệ biểu hiện
gen tạm thời, tối ưu và tinh sạch protein GP5ecto-M bằng phương pháp mITC cho thấy đã tinh
sạch thành công loại protein này. Đây là cơ sở khoa học quan trọng để tiến hành biểu hiện tạm thời
và tinh sạch kháng nguyên GP5ecto-M ở quy mô lớn nhằm mục đích nghiên cứu tính sinh miễn
dịch trên động vật và sản xuất vaccine tiểu đơn vị phòng chống PRRSV. |
|---|